1. 海洋細(xì)菌培養(yǎng)基

海洋生物：

1．嗜鹽性，這是所有海洋微生物幾乎都具備的特點,。

2．嗜冷性,，海洋中大多數(shù)領(lǐng)域的溫度都在5℃以下，絕大多數(shù)海洋微生物都在低溫中生長,，如果溫度超過37℃,，就會停止生長或死亡。

3．嗜壓性,，深海微生物的嗜壓性是其他微生物所不具備的,。

4．低營養(yǎng)性，海水中所含的營養(yǎng)物質(zhì)非常稀少,，部分海洋細(xì)菌要求在營養(yǎng)貧乏的培養(yǎng)基上生長,。

2. 海洋真菌培養(yǎng)基

倆問題 保存方法: （1）室溫保存 （2）低溫保存 （3）礦物油下保存 （4）土壤中保存 （5）干燥保存 （6）冷凍干燥保存 （7）滅菌蒸餾水中保存 真菌培養(yǎng)基 沙堡瓊脂培養(yǎng)基的制備：用天平稱取蛋白胨10克、麥芽糖40克,、瓊脂20克,，用量筒量取蒸餾水1000毫升置燒杯中混勻，在電爐上加熱熔化,，加熱過程中不斷用玻璃棒攪拌,，調(diào)整PH值至5.4，倒入錐形瓶中,，115℃滅菌20分鐘,，傾注平板，冷卻.

3. 海洋微生物培養(yǎng)基

海洋微生物為了生存,，不得不適應(yīng)復(fù)雜多變的海洋環(huán)境,，因而它具備一些獨特的特性。

1．嗜鹽性這是所有海洋微生物幾乎都具備的特點,。真正的海洋微生物要想生長,，就離不開海水。海水中含有豐富的無機鹽類和微量元素,。鈉為海洋微生物生長與代謝所必需,，此外，鉀,、鎂,、鈣、磷,、硫或其他微量元素也是某些海洋微生物維持生命必不可少的,。

2．嗜冷性海洋中大多數(shù)領(lǐng)域的溫度都在5℃以下，絕大多數(shù)海洋微生物都在低溫中生長,，如果溫度超過37℃,，就會停止生長或死亡。生活在低溫環(huán)境下且最高生長溫度不超過20℃,，最適宜溫度在15℃,，在0℃可生長繁殖的微生物，就稱為嗜冷微生物,。嗜冷菌在極地,、深海或高緯度的海域中較常見,。其細(xì)胞膜構(gòu)造具有適應(yīng)低溫的特點,。那種嚴(yán)格依賴低溫才能生存的嗜冷菌對熱反應(yīng)極為敏感，即使處于中溫也會阻礙它的生長與代謝,。

3．嗜壓性深海微生物的嗜壓性是其他微生物所不具備的,。淺海的微生物通常只能忍耐較低的壓力，而深海的嗜壓細(xì)菌則具有在高壓環(huán)境下生長的能力,，能在高壓環(huán)境中保持其酶系統(tǒng)的穩(wěn)定性,。海洋中靜水壓力因水深而有所不同,，水深每增加10米，靜水壓力遞增1個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓,。海洋底部的靜水壓力可超過1000大氣壓,。在深海水域中，約一半以上的海洋環(huán)境處在100～1100大氣壓的壓力之中,。海洋的這種壓力使淺海和陸源細(xì)菌失去在深海中生長的機會,。

4．低營養(yǎng)性海水中所含的營養(yǎng)物質(zhì)非常稀少，部分海洋細(xì)菌要求在營養(yǎng)貧乏的培養(yǎng)基上生長,。在營養(yǎng)較豐富的培養(yǎng)基上,，有些細(xì)菌于第一次形成菌落后即迅速死亡，有些則根本無法形成菌落,。這類海洋細(xì)菌在形成菌落過程中因其自身代謝產(chǎn)物積聚過多而中毒致死,。這種現(xiàn)象說明用常規(guī)的平板法來分離海洋微生物，并不是一種較理想的方法,。

5．趨化性雖然海水中的營養(yǎng)物質(zhì)較稀少,，但海洋環(huán)境中各種固體表面或不同性質(zhì)的界面上仍有一些豐富的營養(yǎng)物吸附積聚在上面。絕大多數(shù)海洋細(xì)菌都有一定的運動能力,，其中某些細(xì)菌還能夠沿著某種化合物濃度梯度進行移動,，這種特點就稱為趨化性。某些靠依附在海洋植物體表生長的細(xì)菌稱為植物附生細(xì)菌,。海洋微生物附著在海洋中生物和非生物固體的表面,，形成薄膜，為其他生物的附著提供條件,，進一步形成穩(wěn)定的附著生物區(qū)系,。

6．多形性通過顯微鏡觀察細(xì)菌，有時候會發(fā)現(xiàn),，在同一株細(xì)菌純培養(yǎng)中會出現(xiàn)多種形態(tài),，如球形、橢圓形,、桿狀或各種不規(guī)則形態(tài)的細(xì)胞,。這種多形現(xiàn)象在海洋革蘭氏陰性桿菌中的表現(xiàn)尤為普遍?？磥?，微生物是為了適應(yīng)復(fù)雜的海洋環(huán)境，而逐漸形成了這種特征,。

7．發(fā)光性在海洋細(xì)菌中,，具有發(fā)光特征的種類并不多。海洋發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強度的大小，除了種的自身特性外,，在很大程度上取決于各種外界條件的綜合作用,，如海洋環(huán)境要素、水中污染狀況等,。細(xì)菌發(fā)光現(xiàn)象對理化因子反應(yīng)敏感,，因此利用發(fā)光細(xì)菌來檢驗水域污染狀況，通常會收到不錯的效果,。

4. 海洋生物細(xì)菌

海水中以革蘭氏陰性桿菌占優(yōu)勢，常見的有假單胞菌屬,、弧菌屬,、無色桿菌屬、黃桿菌屬,、螺菌屬,、微球菌屬、八疊球菌屬,、芽孢桿菌屬 ,、棒桿菌屬、枝動菌屬,、諾卡氏菌屬和鏈霉菌屬等10多個屬,；海洋細(xì)菌是海洋中分布最廣、數(shù)量最大的一類生物,，其中危害最大的屬腐生細(xì)菌,。

5. 海洋微生物培養(yǎng)基的配制實驗報告

1、配制溶液

配制固體培養(yǎng)基時,，先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸,，再將稱好的瓊脂加入，繼續(xù)加熱至完全融化,。并不斷攪拌,，以免瓊脂糊底燒焦。

2,、調(diào)節(jié)pH值?

用pH試紙（或pH電位計,、氫離子濃度比色計）測試培養(yǎng)基的pH值，如不符合需要,，可用10%HCl或10%NaOH進行調(diào)節(jié),，直到調(diào)節(jié)到配方要求的pH值為止。

3,、過濾

用濾紙,、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yǎng)基過濾。用紗布過濾時,，最好折疊成六層,，用濾紙過濾時,，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏斗上過濾,。

4,、分裝

已過濾的培養(yǎng)基應(yīng)進行分裝。如果要制作斜面培養(yǎng)基,，須將培養(yǎng)基分裝于試管中,。

6. 海水培養(yǎng)基

一、一級培養(yǎng)：在0.5～5升的三角瓶中進行,。一般在屋檐等無太陽直射卻有足夠光線的地方,，務(wù)必通風(fēng)陰涼，一般氣溫不超過32℃,，光照強度不超過10000勒克斯,。建議有條件的養(yǎng)殖場購置高壓滅菌鍋。

二,、二級培養(yǎng)：在4～50升,，可以在5升的三角瓶進行，也可以在白色塑料桶內(nèi)進行,，高溫季節(jié)一般在5升三角瓶內(nèi)進行,，便于將三角瓶搬動到適宜場所培養(yǎng)。從250毫克的一級藻種開始,，隨后擴展到2～4升的三角瓶內(nèi)開始二級培養(yǎng),。每天從二級培養(yǎng)液中取出200～400毫升用做繼代培養(yǎng)，余者作為三級培養(yǎng)的藻種,。

三,、三級培養(yǎng)：三級培養(yǎng)池可以建在樓頂，每個池大小為長2.5米,、寬1.25米,、高0.6米，池內(nèi)貼白色瓷磚,。三級培養(yǎng)池上面有鐵架,，鐵架上覆蓋太陽網(wǎng)做成涼棚，既避免太陽直射入池內(nèi),，又保證通風(fēng),，采用培養(yǎng)池+缸外過濾器+冷水機串聯(lián)模式進行三級培養(yǎng)。培養(yǎng)前應(yīng)進行徹底消毒,?？稍谶^濾海水中加入25毫克/升的次氯酸鈉消毒，打開缸外過濾器使用循環(huán)，消毒過濾器與冷水機,。培養(yǎng)前應(yīng)測定是否氯殘留,。殘留的氯可以用過量的、蒸餾水配制的硫代硫酸鈉溶液還原,。進行金藻培養(yǎng)時,，三級培養(yǎng)一定要注意添加維生素。

7. 海洋細(xì)菌培養(yǎng)基的配制

肉蛋白胨培養(yǎng)基配方牛肉膏 3.0g蛋白胨 10.0gNaCl 5.0g瓊脂 15-25g水 1000mlpH 7.4-7.6配制具體步驟? 稱量? 溶化? 調(diào)pH? 過濾? 分裝? 加塞? 包扎? 滅菌? 擱置斜面? 無菌檢查生理鹽水稱取0.9克氯化鈉,，溶解在少量蒸餾水中,，稀釋到100毫升

8. 海洋細(xì)菌培養(yǎng)基的作用

沙保羅培養(yǎng)基 是一種最基本的非選擇性培養(yǎng)基， 含有氨源,、碳源和微量無機鹽適合一 般細(xì)菌的生長繁殖,。因含有動、植物兩種蛋白質(zhì),，苛養(yǎng)菌也可利其中的營養(yǎng) 進行增殖。

9. 海洋細(xì)菌培養(yǎng)基有哪些

PCA啊,，平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基,。

10. 海洋放線菌培養(yǎng)基

選擇性培養(yǎng)基,，是指根據(jù)某種(類)微生物特殊的營養(yǎng)要求或?qū)δ承┨厥饣瘜W(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的,，能選擇性區(qū)分這種(類)微生物的培養(yǎng)基,。

利用選擇性培養(yǎng)基，可使混合菌群中的某種(類)微生物變成優(yōu)勢種群,，從而提高該種(類)微生物的篩選效率,。

例如，以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于篩選纖維素降解菌;無氮培養(yǎng)基只能供有固氮能力的菌生長,，是固氮菌的選擇性培養(yǎng)基;pH5.0?5.5的培養(yǎng)基有利于真菌的生長,，而中性或微堿性的培養(yǎng)基對細(xì)菌和放線菌生長更有利;在培養(yǎng)基中加入特定的染料或抗生素抑制某些菌的生長，也可提高培養(yǎng)基的選擇性,，對于篩選菌種具有重要的實踐意義,。

11. 海洋細(xì)菌的分離和培養(yǎng)

以海洋水體為正常棲居環(huán)境的一切微生物。但由于學(xué)科傳統(tǒng)及研究方法的不同,本文不介紹單細(xì)胞藻類,而只討論細(xì)菌,、真菌及噬菌體等狹義微生物學(xué)的對象,。

海洋細(xì)菌是海洋生態(tài)系統(tǒng)中的重要環(huán)節(jié)。作為分解者它促進了物質(zhì)循環(huán);在海洋沉積成巖及海底成油成氣過程中,，都起了重要作用,。

還有一小部分化能自養(yǎng)菌則是深海生物群落中的生產(chǎn)者。

海洋細(xì)菌可以污損水工構(gòu)筑物，在特定條件下其代謝產(chǎn)物如氨及硫化氫也可毒化養(yǎng)殖環(huán)境,，從而造成養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟損失,。

但海洋微生物的頡頏作用可以消滅陸源致病菌，它的巨大分解潛能幾乎可以凈化各種類型的污染,，它還可能提供新抗生素以及其他生物資源,，因而隨著研究技術(shù)的進展，海洋微生物日益受到重視,?！咎匦浴?與陸地相比，海洋環(huán)境以高鹽,、高壓,、低溫和稀營養(yǎng)為特征。

海洋微生物長期適應(yīng)復(fù)雜的海洋環(huán)境而生存,，因而有其獨具的特性,。

嗜鹽性 海洋微生物最普遍的特點。真正的海洋微生物的生長必需海水,。海水中富含各種無機鹽類和微量元素,。

鈉為海洋微生物生長與代謝所必需此外,鉀、鎂,、鈣,、磷、硫或其他微量元素也是某些海洋微生物生長所必需的,。

嗜冷性 大約90%海洋環(huán)境的溫度都在5℃以下,絕大多數(shù)海洋微生物的生長要求較低的溫度,，一般溫度超過37℃就停止生長或死亡。

那些能在 0℃生長或其最適生長溫度低于20℃的微生物稱為嗜冷微生物,。

嗜冷菌主要分布于極地,、深海或高緯度的海域中,。其細(xì)胞膜構(gòu)造具有適應(yīng)低溫的特點,。那種嚴(yán)格依賴低溫才能生存的嗜冷菌對熱反應(yīng)極為敏感，即使中溫就足以阻礙其生長與代謝,。

嗜壓性 海洋中靜水壓力因水深而異,，水深每增加10米,靜水壓力遞增1個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓。海洋最深處的靜水壓力可超過1000大氣壓,。深海水域是一個廣闊的生態(tài)系統(tǒng),約56%以上的海洋環(huán)境處在100~1100大氣壓的壓力之中,，嗜壓性是深海微生物獨有的特性。來源于淺海的微生物一般只能忍耐較低的壓力,，而深海的嗜壓細(xì)菌則具有在高壓環(huán)境下生長的能力,，能在高壓環(huán)境中保持其酶系統(tǒng)的穩(wěn)定性,。

研究嗜壓微生物的生理特性必需借助高壓培養(yǎng)器來維持特定的壓力。

那種嚴(yán)格依賴高壓而存活的深海嗜壓細(xì)菌,，由于研究手段的限制迄今尚難于獲得純培養(yǎng)菌株,。

根據(jù)自動接種培養(yǎng)裝置在深海實地實驗獲得的微生物生理活動資料判斷，在深海底部微生物分解各種有機物質(zhì)的過程是相當(dāng)緩慢的,。

低營養(yǎng)性 海水中營養(yǎng)物質(zhì)比較稀薄,，部分海洋細(xì)菌要求在營養(yǎng)貧乏的培養(yǎng)基上生長。

在一般營養(yǎng)較豐富的培養(yǎng)基上,，有的細(xì)菌于第一次形成菌落后即迅速死亡,，有的則根本不能形成菌落。

這類海洋細(xì)菌在形成菌落過程中因其自身代謝產(chǎn)物積聚過甚而中毒致死,。

這種現(xiàn)象說明常規(guī)的平板法并不是一種最理想的分離海洋微生物方法,。

趨化性與附著生長 海水中的營養(yǎng)物質(zhì)雖然稀薄，但海洋環(huán)境中各種固體表面或不同性質(zhì)的界面上吸附積聚著較豐富的營養(yǎng)物,。

絕大多數(shù)海洋細(xì)菌都具有運動能力,。其中某些細(xì)菌還具有沿著某種化合物濃度梯度移動的能力，這一特點稱為趨化性,。

某些專門附著于海洋植物體表而生長的細(xì)菌稱為植物附生細(xì)菌,。海洋微生物附著在海洋中生物和非生物固體的表面，形成薄膜,，為其他生物的附著造成條件，從而形成特定的附著生物區(qū)系,。

多形性 在顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)時,，有時在同一株細(xì)菌純培養(yǎng)中可以同時觀察到多種形態(tài),如球形橢圓形、大小長短不一的桿狀或各種不規(guī)則形態(tài)的細(xì)胞,。

這種多形現(xiàn)象在海洋革蘭氏陰性桿菌中表現(xiàn)尤為普遍,。

這種特性看來是微生物長期適應(yīng)復(fù)雜海洋環(huán)境的產(chǎn)物。

發(fā)光性 在海洋細(xì)菌中只有少數(shù)幾個屬表現(xiàn)發(fā)光特性,。

發(fā)光細(xì)菌通?？蓮暮Ｋ螋~產(chǎn)品上分離到。

細(xì)菌發(fā)光現(xiàn)象對理化因子反應(yīng)敏感,，因此有人試圖利用發(fā)光細(xì)菌為檢驗水域污染狀況的指示菌,。【分布】 海洋細(xì)菌分布廣,、數(shù)量多,，在海洋生態(tài)系統(tǒng)中起著特殊的作用。海洋中細(xì)菌數(shù)量分布的規(guī)律是:近海區(qū)的細(xì)菌密度較大洋大,，內(nèi)灣與河口內(nèi)密度尤大;表層水和水底泥界面處細(xì)菌密度較深層水大,，一般底泥中較海水中大;不同類型的底質(zhì)間細(xì)菌密度差異懸殊,，一般泥土中高于沙土。大洋海水中細(xì)菌密度較小,，每毫升海水中有時分離不出1個細(xì)菌菌落,因此必須采用薄膜過濾法:將一定體積的海水樣品用孔徑0.2微米的薄膜過濾,，使樣品中的細(xì)菌聚集在薄膜上，再采用直接顯微計數(shù)法或培養(yǎng)法計數(shù),。大洋海水中細(xì)菌密度一般為每40毫升幾個至幾十個,。在海洋調(diào)查時常發(fā)現(xiàn)某一水層中細(xì)菌數(shù)量劇增，這種微區(qū)分布現(xiàn)象主要決定于海水中有機物質(zhì)的分布狀況,。一般在赤潮之后往往伴隨著細(xì)菌數(shù)量增長的高峰,。有人試圖利用微生物分布狀況來指示不同水團或溫躍層界面處有機物質(zhì)積聚的特點，進而分析水團來源或轉(zhuǎn)移的規(guī)律,。 海水中的細(xì)菌以革蘭氏陰性桿菌占優(yōu)勢,，常見的有假單胞菌屬等10余個屬。相反,，海底沉積土中則以革蘭氏陽性細(xì)菌偏多,。芽胞桿菌屬是大陸架沉積土中最常見的屬。 海洋真菌多集中分布于近岸海域的各種基底上,，按其棲住對象可分為寄生于動植物,、附著生長于藻類和棲住于木質(zhì)或其他海洋基底上等類群。某些真菌是熱帶紅樹林上的特殊菌群,。某些藻類與菌類之間存在著密切的營養(yǎng)供需關(guān)系,，稱為藻菌半共生關(guān)系。 大洋海水中酵母菌密度為每升 5~10個,。近岸海水中可達每升幾百至幾千個,。海洋酵母菌主要分布于新鮮或腐爛的海洋動植物體上，海洋中的酵母菌多數(shù)來源于陸地,，只有少數(shù)種被認(rèn)為是海洋種,。海洋中酵母菌的數(shù)量分布僅次于海洋細(xì)菌。 在海洋環(huán)境中的作用,。海洋堪稱為世界上最龐大的恒化器,，能承受巨大的沖擊(如污染)而仍保持其生命力和生產(chǎn)力;微生物在其中是不可缺少的活躍因素。自人類開發(fā)利用海洋以來,，競爭性的捕撈和航?；顒印⒋蠊I(yè)興起帶來的污染以及海洋養(yǎng)殖場的無限擴大,，使海洋生態(tài)系統(tǒng)的動態(tài)平衡遭受嚴(yán)重破壞,。海洋微生物以其敏感的適應(yīng)能力和快速的繁殖速度在發(fā)生變化的新環(huán)境中迅速形成異常環(huán)境微生物區(qū)系，積極參與氧化還原活動,，調(diào)整與促進新動態(tài)平衡的形成與發(fā)展,。從暫時或局部的效果來看,，其活動結(jié)果可能是利與弊兼有，但從長遠(yuǎn)或全局的效果來看,，微生物的活動始終是海洋生態(tài)系統(tǒng)發(fā)展過程中最積極的一環(huán),。 海洋中的微生物多數(shù)是分解者，但有一部分是生產(chǎn)者,，因而具有雙重的重要性,。實際上，微生物參與海洋物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化的全過程,。海洋中分解有機物質(zhì)的代表性菌群是:分解有機含氮化合物者有分解明膠,、魚蛋白、蛋白胨,、多肽,、氨基酸、含硫蛋白質(zhì)以及尿素等的微生物;利用碳水化合物類者有主要利用各種糖類,、淀粉,、纖維素、瓊脂,、褐藻酸,、幾丁質(zhì)以及木質(zhì)素等的微生物。此外,，還有降解烴類化合物以及利用芬香化合物如酚等的微生物,。海洋微生物分解有機物質(zhì)的終極產(chǎn)物如氨、供主要氫和系中,，某一或自養(yǎng)微生物,，、浮游動物以及底棲動物等提供直接的營養(yǎng)源,。這在食物鏈上有助于初級或高層次的生物生產(chǎn)。在深海底部,，硫細(xì)菌實際上負(fù)擔(dān)了全部初級生產(chǎn),。 在海洋動植物體表或動物消化道內(nèi)往往形成特異的微生物區(qū)系，如弧菌等是海洋動物消化道中常見的細(xì)菌,，分解幾丁質(zhì)的微生物往往是肉食性海洋動物消化道中微生物區(qū)系的成員,。真菌、酵母和利用各種多糖類的細(xì)菌常是某些海藻體上的優(yōu)勢菌群,。微生物代謝的中間產(chǎn)物如抗生素,、維生素、氨基酸或毒素等是促進或限制某些海洋生物生存與生長的因素,。某些浮游生物與微生物之間存在著相互依存的營養(yǎng)關(guān)系,。如細(xì)菌為浮游植物提供維生素等營養(yǎng)物質(zhì),，浮游植物分泌乙醇酸等物質(zhì)作為某些細(xì)菌的能源與碳源。 由于海洋微生物富變異性,，故能參與降解各種海洋污染物或毒物,，這有助于海水的自凈化和保持海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn) 定。