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海洋天然產(chǎn)物如何提取分離(海洋天然產(chǎn)物提取分離純化的流程和技術(shù))

來源:cdfbk.cn???時間:2023-06-17 17:48???點擊:269??編輯:jing 手機版

1. 海洋天然產(chǎn)物提取分離純化的流程和技術(shù)

分菌株對應(yīng)的噬菌體分離過程步驟:

1、噬菌體分離

(1) 以新鮮鴿糞4g 加入100ml 普通液體培養(yǎng)基內(nèi),,放入37 ℃溫箱培養(yǎng)24h,。

(2) 次日從中取出10ml70 ℃加熱30min ,離心2000r/ 10min ,上清液用濾器過濾后保存于4 ℃冰箱備用。

(3) 在普通瓊脂平板底面分別注明1,、2,、3 號。

(4)在1 號平板接種事先培養(yǎng)好的6h 幼齡菌乙型副傷寒桿菌一接種環(huán),;2 號平板接種幼齡菌福氏痢疾桿菌一接種環(huán);3 號平板接種幼齡菌大腸桿菌一接種環(huán),各平板的細(xì)菌密集涂布于瓊脂平板表面,。

(5) 再用無菌接種環(huán)取鴿糞培養(yǎng)濾液一接種環(huán),分別滴加于3 個已接種細(xì)菌的平板中央,放入37 ℃溫箱孵育24h。

2,、噬菌體的分離和鑒定

先后從農(nóng)貿(mào)市場采集各類海產(chǎn)品158 份, 分別用15 株假單胞菌作指示菌, 共分離到27 株噬菌體, 分離率為1711%,。檢出的噬菌體經(jīng)實驗室反復(fù)增殖,、裂解等鑒定試驗, 從中精選出9 株裂解力較強, 生物學(xué)性狀較典型的噬菌體, 分別用雙層瓊脂法作單斑純化培養(yǎng)。

這9 株噬菌體的噬菌斑圓形透明, 邊緣有的整齊有的稍不整齊, 直徑均在110~210 mm; 在電鏡下的形態(tài)可見有頭部和尾部, 均呈蝌蚪狀; 增殖液的效價均可達(dá)10829pfu?m l,。

3,、噬菌體的分離

在有指示菌的雙層瓊脂平板上逐格滴加備用的待檢噬菌體液,進(jìn)行交叉裂解試驗,即每一株菌均被所有待檢噬菌體液逐一滴加。

待平皿干后,置37 ℃培養(yǎng)過夜,。若有相應(yīng)的噬菌體存在,即可在平皿上出現(xiàn)裂解噬斑(即為陽性) ,不裂解者為陰性,。對分離到的每一噬菌體均經(jīng)單噬斑分離純化3 次以上,增殖后置4 ℃冰箱保存。

4,、大連近海河流弧菌Ⅱ噬菌體的分離與研究

4.1  材料與方法

4.2  菌株

噬菌體分離所用的指示菌為河流弧菌29301 , 用于宿主范圍測定的菌株共8 株: 河流弧菌Ⅱ9302 , 9401 , 9402 , 9403 , 9404 , 9501 , 9502 及9503 均為本實驗室保存,。

4.3  培養(yǎng)基

培養(yǎng)河流弧菌及噬菌體分離所用的培養(yǎng)基為海水胰蛋白胨培養(yǎng)基。其中: 胰蛋白胨10g , 酵母膏5g , 陳海水1000mL , pH712~715 ,。制作底層培養(yǎng)基時, 加瓊脂15g ; 制作上層培養(yǎng)基時, 加瓊脂7g,。

4.4  樣品的采集和噬菌體的分離

1996、1997 年兩個夏季, 從大連市水產(chǎn)養(yǎng)殖公司所屬皺紋盤鮑養(yǎng)殖區(qū)的不同地點采集海水和海底淤積物, 每次采集10 個樣品, 每個樣品為同一地點采集的3 份不同水樣或海底淤積物混合而成,。

為了分離噬菌體, 取海底淤積物100g , 加入等量海水, 充分振蕩30min , 靜置, 過濾, 取上清液100mL 加入50mL 3 倍濃縮的海水胰蛋白胨及2mL 濃度為1012個/ mL 的河流弧菌2 菌懸液, 30 ℃培養(yǎng)過夜, 以促進(jìn)噬菌體的增殖,。海水樣品過濾后按上述方法直接富集。

經(jīng)富集后的培養(yǎng)液加入1/ 10 的氯仿, 30 ℃靜止1h , 于4000r/ min 離心20min , 取上清液用于雙層瓊脂法分離噬菌體,。為了純化噬菌體, 挑取單斑連續(xù)傳代, 重復(fù)進(jìn)行5 次以上, 選擇平板上所有噬菌斑形態(tài)和大小基本一致的材料,進(jìn)行下一步研究,。

2. 海水提純

提煉物質(zhì)如下:除氫(H)和氧(O)外,還有氯(Cl)、鈉(Na),、鎂(Mg),、硫(S)、鈣(Ca),、鉀(K),、溴(Br)、碳(C),、鍶(Sr),、硼(B)、氟(F),、鐵,、鉬、鉀,、鈾,、碘、金,、銀,、和鎘等。

海水是海中或來自海中的水,。海水是流動的,,對于人類來說,,可用水量是不受限制的。海水是名副其實的液體礦產(chǎn),,平均每立方公里的海水中有3570萬噸的礦物質(zhì),,世界上已知的100多種元素中,80%可以在海水中找到,,除氫(H)和氧(O)外,還有氯(Cl),、鈉(Na)、鎂(Mg),、硫(S),、鈣(Ca)、鉀(K),、溴(Br),、碳(C)、鍶(Sr),、硼(B),、氟(F)、鐵,、鉬,、鉀、鈾,、碘,、金、銀,、和鎘等,。

3. 海洋天然產(chǎn)物提取分離純化的流程和技術(shù)方法

宏基因組學(xué)研究的對象是特定環(huán)境中的總DNA,不是某特定的微生物或其細(xì)胞中的總DNA,,不需要對微生物進(jìn)行分離培養(yǎng)和純化,,這對我們認(rèn)識和利用95%以上的未培養(yǎng)微生物提供了一條新的途徑。已有研究表明,,利用宏基因組學(xué)對人體口腔微生物區(qū)系進(jìn)行研究,,發(fā)現(xiàn)了50多種新的細(xì)菌,這些未培養(yǎng)細(xì)菌很可能與口腔疾病有關(guān),。此外,在土壤,、海洋和一些極端環(huán)境中也發(fā)現(xiàn)了許多新的微生物種群和新的基因或基因簇,,通過克隆和篩選,獲得了新的生理活性物質(zhì),,包括抗生素,、酶以及新的藥物等,。

4. 海洋元素提取

海水中溴的濃度較高,在海水中溶解物質(zhì)的順序表中可排在第7位,,平均濃度大約為67毫克/升,。海水中溴的總含量有95萬億噸之多,占整個地球溴總儲量的99%以上,,因此可以說溴是“海洋元素”,。

我們所使用的青霉素、鏈霉素等各種抗菌素都離不開溴,。溴不僅與人類的生活和健康有關(guān),,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上也大有用途,用溴制作的熏蒸劑和殺蟲劑,,可以消滅害蟲,。

在工業(yè)方面,溴也有用武之地,。目前溴大量地用作燃料的抗爆劑,,把二溴乙烷同四乙基鉛加到汽油中,可使燃燒后所產(chǎn)生的氧化鉛變成具有揮發(fā)性的溴化鉛排出,,可防止汽油爆炸,。用溴能生產(chǎn)一種溴丁橡膠。

5. 海洋提取物功效與作用

萬通海藻鈣是一種好的補鈣產(chǎn)品,。因為海藻鈣是一種天然的鈣源,,不含有鉛重金屬等對人體有害物質(zhì),而且其含有豐富的礦物質(zhì)和微量元素,,可以促進(jìn)骨骼的健康發(fā)展,。此外,萬通海藻鈣采用了當(dāng)今先進(jìn)的營養(yǎng)技術(shù),,可以較好的被人體吸收,。除了萬通海藻鈣,市面上還有很多其他的補鈣產(chǎn)品,。不同產(chǎn)品采用的鈣源和營養(yǎng)技術(shù)不同,,所以在選擇補鈣產(chǎn)品時要結(jié)合自身情況選擇適合自己的產(chǎn)品。同時,,為了更好的吸收鈣質(zhì),,也要在日常生活中注意飲食搭配,攝取足夠的維生素D和蛋白質(zhì)等,。

6. 海洋天然產(chǎn)物提取分離純化的流程和技術(shù)要求

1.

吸附法:為了回收鈾,,科研工作者們嘗試了很多方法,吸附法是目前最有效的方法之一,;將吸附劑裝入有網(wǎng)眼的尼龍袋中,,用船拖著在海水中飄游,,或?qū)⑽絼┭b入吸附柱中,把海水泵入吸附柱,,通過吸附劑和海水接觸而吸附鈾,。如用水合氧化鈦吸附劑,每克吸附鈾量為幾十至200μg,。用堿性溶液(碳酸銨或碳酸鈉溶液)淋洗吸附有鈾的水合氧化鈦,,得到含鈾約9mgU/L(注:U/L是:單位/公升)的淋洗液。經(jīng)過一次吸附和淋洗,,鈾濃度由海水中的3.3產(chǎn)μgU/L(注:U/L是:單位/公升)提高至淋洗液中的9mgU/L(注:U/L是:單位/公升),,提高了近3000倍。但此時的鈾濃度還很低,,需作進(jìn)一步富集,。可用陰離子交換樹脂進(jìn)行第二次吸附,,再用中性鹽溶液將離子交換樹脂上的鈾淋洗出來,。第二次淋洗液的鈾濃度達(dá)3.5gU/L(注:U/L是:單位/公升)左右,可用常規(guī)方法從這種淋洗液中沉淀鈾制取鈾鹽產(chǎn)品,。

2.

石灰法:這種方法用廉價的石灰與海水的鎂發(fā)生反應(yīng)來提取鈾,;

3.

生物處理法:由于有些微生物天然存在含鈾的礦物或基質(zhì)中,可以利用這些微生物使海水中的鈾轉(zhuǎn)化為不溶與水的形式,;

7. 海洋生物中分離出的天然產(chǎn)物類型主要有

不存在這種情況因為所有已知的海洋動物都有心臟,,它是維持生命所必需的器官之一,它的功能是將血液從身體各個部位輸送到肺和其他呼吸器官進(jìn)行氣體交換,,然后由心臟再將氧氣飽和的血液傳送回體內(nèi)各個部位,。如果海洋動物沒有心臟,血液無法循環(huán),,身體各個部位無法得到氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng),,生命將無法存續(xù)??赡艹霈F(xiàn)誤解的原因是,,有些海洋生物體內(nèi)的心臟不具備完整的結(jié)構(gòu),比如某些無脊椎動物的心臟只有一個腔室,,但這并不影響它們具有心臟的生命體征,。

8. 海洋生物成分提取

歐米伽-3是一種重要的多不飽和脂肪酸,可以從多種食物中提取,,包括一些魚類,、植物油和其他食物中。

魚類是歐米伽-3的主要來源之一,,特別是深海魚類,,例如三文魚、鱈魚,、金槍魚和沙丁魚等,。這些魚類中含有豐富的EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸),是人體合成歐米伽-3所必需的營養(yǎng)成分,。另外,,歐米伽-3還可以從其他動物來源中提取,如牛奶,、乳制品和蛋黃等,。

植物油也是歐米伽-3的一種來源,尤其是亞麻籽油,、蕎麥油,、菜籽油、葵花籽油等,。這些植物油中含有α-亞麻酸,,是歐米伽-3的前體物質(zhì),可以通過人體代謝轉(zhuǎn)變成EPA和DHA,。

此外,,一些食品和營養(yǎng)補充劑中也添加了歐米伽-3,如魚油,、海藻油,、藻類等。

總之,,歐米伽-3可以從多種食物中提取,,但是深海魚類、亞麻籽油和魚油等是歐米伽-3最常見和有效的來源,。

9. 海洋提取物有哪些

形容大海的水只要一瓢的成語是:弱水三千只取一瓢[ ruò shuǐ sān qiān zhī qǔ yī piáo ]

源起佛經(jīng)中的一則故事,,寓意在一生中可能會遇到很多美好的東西,但只要用心好好把握住其中的一樣就足夠了,。也比喻對愛情忠貞,、專一。

引用:近代詩人蘇曼殊的《碎簪記》,,里面有段對白:余曰:然則二美并愛之矣,。莊湜復(fù)嘆曰:君思‘弱水三千’之意,當(dāng)知吾心,。又問:然君意屬誰先,?余曰:淑芳。

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